液相色譜儀中樣品殘留有哪些解決辦法？在科學(xué)實(shí)驗(yàn)中，任何一項(xiàng)異常都會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的結(jié)果偏差，甚至?xí)绊懙胶罄m(xù)的分析，液相色譜儀是儀器中常用設(shè)備之一，殘留物的存在一直常見于實(shí)驗(yàn)中，那么你知道液相色譜儀中樣品殘留有哪些解決辦法嗎？接下來隨著天恒儀器小編一起來學(xué)習(xí)一下吧！

　　1.分類結(jié)轉(zhuǎn)。

　　第一經(jīng)典殘留物觀察到的結(jié)果是，當(dāng)空白連續(xù)注射時(shí)，殘留峰的大小有規(guī)律地減小。例如，第一個(gè)空白峰可能是原始大小的1%，然后下一個(gè)空白峰又下降了100倍。這種承載通常是由流路中的機(jī)械區(qū)域引起的(例如，閥頭中的兩個(gè)表面，管道插入其中，螺母被型鍛)。在空白進(jìn)樣期間，一些樣品的保留會(huì)逐漸稀釋，導(dǎo)致每次空白運(yùn)行期間的殘留量逐漸減少。

　　第二連續(xù)結(jié)轉(zhuǎn)-不是真正的結(jié)轉(zhuǎn)。所有樣品和空白總是有一個(gè)小峰值，不會(huì)隨著每次空白運(yùn)行而減少。這是一些污染源造成的。如果污染物峰值似乎隨著空白進(jìn)樣量的增加和減少而增加或減少，則空白很可能被污染。如果不是，污染源在系統(tǒng)的其他地方。

　　第三，考慮“空注”操作的重要性。島津自動(dòng)進(jìn)樣器提供獨(dú)特的空采樣能力，無需采樣或旋轉(zhuǎn)自動(dòng)進(jìn)樣器的采樣閥或高壓閥即可開始色譜操作。這個(gè)簡單的測(cè)試可以幫助確定問題的根源是否是注射事件本身。不產(chǎn)生不符合要求的峰的空運(yùn)行必須表明自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣事件是問題的根源。它不能證明自動(dòng)進(jìn)樣器中殘留物的來源，但它確實(shí)將問題縮小到了高壓閥(人乳頭瘤病毒)、其接頭和連接色譜柱的出口管。由于島津自動(dòng)取樣器采用針流道設(shè)計(jì)，

　　2.更換空白并改變注射量。

　　一件重要的事情是排除空白本身是否可能被污染。檢查的一個(gè)簡單方法是使用不同的基質(zhì)來源來制備新的空白(即溶劑本身可能被污染)。此外，改變進(jìn)樣量也有幫助——如果空白的進(jìn)樣量增加，殘留峰的峰面積也增加，則強(qiáng)烈表明空白被污染。如果您注意到殘余峰的大小保持不變，則殘余物很可能位于針頭外部(請(qǐng)參考外部自動(dòng)進(jìn)樣器沖洗說明)。如果您注意到殘余峰的大小隨著每次后續(xù)注射而減小，則殘余物很可能位于針和/或樣品環(huán)內(nèi)(請(qǐng)參考沖洗內(nèi)部自動(dòng)進(jìn)樣器的說明)。

　　3.不包括色譜柱。

　　色譜柱可能是殘留物的來源，尤其是當(dāng)隨著時(shí)間推移出現(xiàn)結(jié)垢時(shí)。重復(fù)注射含有耐火材料或強(qiáng)保留成分的樣品，每次注射都會(huì)慢慢改變色譜柱粘結(jié)相的特性。梯度條件可能無法有效清潔此類材料的色譜柱，隨著時(shí)間的推移，問題可能會(huì)惡化。問題列的一個(gè)簡單測(cè)試是將其從系統(tǒng)中移除，并用零死體積替換。正常運(yùn)行樣品，注意沒有色譜柱保留和區(qū)分樣品成分。跟著它跑一兩次。結(jié)轉(zhuǎn)是否繼續(xù)？如果是，問題就和硬件有關(guān)。如果沒有，問題出在柱子上，你應(yīng)該換掉它。另一個(gè)實(shí)驗(yàn)可以顯示柱子是否產(chǎn)生殘留物。創(chuàng)建一個(gè)方法，使泵通過雙梯度，如下圖所示。從注射開始。該程序從低強(qiáng)度洗脫液條件轉(zhuǎn)移到高強(qiáng)度洗脫液條件，以高強(qiáng)度沖洗色譜柱，然后返回初始條件幾分鐘。然后重復(fù)相同的梯度，但不會(huì)發(fā)生新的注射。以這種方式，柱床通過溶劑強(qiáng)度梯度，以觀察殘余峰是否再次產(chǎn)生。如果是，這可能表明填充床或入口篩板是交叉污染的來源，這可能需要更主動(dòng)和更頻繁的柱沖洗。

　　4.檢查流路接頭。

　　程序通常僅限于人乳頭瘤病毒的連接器和檢測(cè)器下游的所有連接器。不銹鋼接頭幾乎沒有問題，但是PEEK接頭和管道在高壓下會(huì)滑動(dòng)。例如大于約4000磅/平方英寸。你可以用扳手稍微擰緊不銹鋼配件來檢查它們。聚醚醚酮接頭和管道的最佳方法是關(guān)閉泵，松開每個(gè)接頭，將管道牢牢推到噴嘴底部，然后重新擰緊接頭。

　　5.檢查自動(dòng)進(jìn)樣器沖洗階段的溶劑。

　　吹掃自動(dòng)進(jìn)樣器，這是一個(gè)預(yù)防性步驟，以確保通向自動(dòng)進(jìn)樣器的所有沖洗管線都用沖洗溶劑計(jì)量，而不是用空氣填充。由于管道中的空氣，針頭或密封件可能沒有被正確沖洗。

　　使用新鮮的沖洗溶劑-用新批次的溶劑替換沖洗階段的溶劑，并用干凈的溶劑替換沖洗階段的容器。更換沖洗溶劑后，在沖洗或沖洗循環(huán)中循環(huán)自動(dòng)進(jìn)樣器幾次，以確保前一沖洗階段的所有溶劑痕跡都已清除。

　　調(diào)整沖洗階段的強(qiáng)度。

　　強(qiáng)洗階段是對(duì)導(dǎo)致殘留物的樣品成分具有親和力的階段。對(duì)于強(qiáng)有機(jī)溶劑的反相色譜，在洗滌混合物中使用更多的有機(jī)溶劑，以確保有效洗滌。通常，使沖洗階段的化學(xué)物質(zhì)與流動(dòng)相的強(qiáng)度大致相等是有效的。有時(shí)值得考慮使用100%強(qiáng)溶劑(通常是乙腈或乙醇)。異丙醇是許多應(yīng)用的優(yōu)秀洗滌溶劑，例如脂肪酸，并且已經(jīng)證明在去除污染物方面比甲醇或乙腈更有效。

　　c.調(diào)節(jié)沖洗的酸堿度。

　　考慮到漂洗階段的pH值是一種化學(xué)“強(qiáng)度”。在某些情況下，殘留分析物可能對(duì)洗滌階段的酸堿度非常敏感。避免使用酸堿度緩沖液或鹽來沖洗混合物，否則蒸發(fā)后會(huì)留下殘留物。切勿使用磷酸鹽緩沖液。使用揮發(fā)性pH調(diào)節(jié)劑，如LCMS流動(dòng)相，如甲酸、乙酸、甲酸銨、乙酸銨或氫氧化銨。通常0.1-1%體積的溶液就足夠了。嘗試在洗滌溶劑中加入酸或堿，看看殘留物是否得到改善。6.啟用自動(dòng)取樣器沖洗機(jī)制。

　　在注射前后啟用針頭沖洗。有關(guān)沖洗類型和操作原理的具體信息，請(qǐng)參考本文件末尾的部分。多種沖洗選項(xiàng)允許將強(qiáng)/弱沖洗化學(xué)品組合用于外部針頭表面沖洗和內(nèi)部注射機(jī)構(gòu)沖洗。

　　7.更換硬件:更換針頭、針頭墊片、注射環(huán)或人乳頭瘤病毒轉(zhuǎn)子。

　　如果仍在嘗試解決剩余問題，則問題很可能與自動(dòng)進(jìn)樣器硬件有關(guān)。此時(shí)，您應(yīng)該更換零件，直到發(fā)現(xiàn)問題。通常，最簡單的第一步是嘗試手動(dòng)進(jìn)樣閥，或者用不接觸目標(biāo)化合物的自動(dòng)進(jìn)樣器替換自動(dòng)進(jìn)樣器。如果這些方法中的任何一種解決了問題，就可以確認(rèn)問題出在自動(dòng)進(jìn)樣器上，值得沿著這條路線進(jìn)行進(jìn)一步的故障排除。如果您還沒有這樣做，請(qǐng)更換自動(dòng)進(jìn)樣器人乳頭瘤病毒上的針頭墊圈，這在許多情況下是罪魁禍?zhǔn)?。如果這不起作用，考慮更換針頭和樣品環(huán)。

　　由于樣品和進(jìn)樣溶劑的特性，有時(shí)樣品會(huì)吸附在樣品環(huán)上。用不同的組合替換循環(huán)可以幫助解決這個(gè)問題。注射環(huán)由不銹鋼和聚醚醚酮制成。新的環(huán)材料和不同注射溶劑的組合應(yīng)消除樣品在環(huán)上的吸附。

　　第三，作為做生意的正常結(jié)果，人乳頭瘤病毒的內(nèi)部構(gòu)件會(huì)隨著時(shí)間的推移而磨損。磨損的轉(zhuǎn)子可能是殘留物的來源，但它通常會(huì)影響色譜峰的質(zhì)量?？紤]修理或更換人乳頭瘤病毒。

　　8.解決具體樣品的遺留問題。

　　到目前為止，已經(jīng)嘗試了所有簡單的方法來解決剩余的問題，因此值得花時(shí)間檢查問題是否針對(duì)您的樣品。有時(shí)，您可以通過檢查樣品中的另一個(gè)峰來進(jìn)行檢查。例如，如果您的方法使用內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，請(qǐng)嘗試注入大量內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，然后注入沒有內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)的空白。也許你可以注射另一種化學(xué)相關(guān)的化合物，在目前的方法條件下會(huì)被洗脫。如果所有其他方法都失敗，您可以更換流動(dòng)相或色譜柱并運(yùn)行另一種方法。如果您發(fā)現(xiàn)殘留問題在不同的化合物或方法條件下很常見，則很可能是與自動(dòng)進(jìn)樣器硬件或系統(tǒng)流程相關(guān)的物理問題。

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